El 1853, les tropes russes sota el comandament del general Perovsky, després d’haver caminat 900 milles a través d’un terreny sense aigua, van assaltar la fortalesa Kokand Ak-Mechet, que cobria totes les rutes cap a l’Àsia Central. Tres-cents Ural i dos-cents cosacs d'Orenburg van participar a la campanya. La fortalesa es va canviar el nom a Fort Perovsky i es va iniciar la construcció de la línia Syr-Darya, que suposadament cobria el territori des del mar d'Aral fins als baixos Urals a partir de les incursions. El 1856 es va iniciar la construcció de fortificacions des del fort Perovsky fins al fort Verny, per tal de cobrir 900 verstes de l’estepa i connectar la línia Syr-Darya i la siberiana, per establir una comunicació entre les tropes siberianes, urals i Orenburg, que ara tenien per protegir una àrea de 3.500 versts. El 1860, les tropes de Kokand van intentar capturar Verny, però els cosacs de Sibèria i Semirechye van rebutjar aquest atac. El 1864 les tropes russes van ocupar Chimkent i van derrotar el poble Kokand. El poble kokand aplega la resta de les seves forces i fa una incursió contra les tropes russes a la fortalesa del Turquestan, però en el camí ensopeguen amb un centenar de cosacs de l’Ural, Esaul Serov. En una batalla de tres dies a Ikan, els cosacs van derrotar l'atac de tot l'exèrcit de Kokand. Dels 110 cosacs, 11 van sobreviure, 47 van resultar ferits, 52 van morir.
El 1865, les tropes russes, juntament amb els cosacs de l’Ural, van ocupar Taixkent. S’estableix la regió de Turkestan. El 1866 van començar les hostilitats contra l'emir de Bukhara reclamant a Taixkent. La incursió de Bukharian va ser rebutjada. El 1868, les tropes russes del general Kaufman, que incloïen els cosacs d’Ural, van anar a Samarcanda i l’emir de Bukhara es va rendir, reconeixent el protectorat de Rússia.
Cosacs d'Orenburg durant la conquesta del Turquestan
El 1869 les tropes russes de Transcaucàsia van desembarcar a la costa oriental del mar Caspi. El 1873 es va organitzar una campanya contra Khiva, el centre més gran del comerç d'esclaus a l'Àsia Central. A través del desert sense aigua, les tropes s’acosten a Khiva des de tres bandes: des de Turkestan, des de la línia d’Orenburg i des de la costa del Caspi. A la campanya hi participen cosacs de Sibèria i Semirechye, cinc-cents Urals, dotze-cents residents a Orenburg, regiments de Kizlyar-Grebensky i Sunzha-Vladikavkaz del Terek i fins i tot una part del regiment Yeisk de l'exèrcit de Kuban. Durant la campanya, la mateixa natura va ser derrotada. Llavors Khiva va ser presa per la tempesta els dies 28 i 29 de maig. El 1875 els cosacs d'Orenburg, Ural, Siberia i Semirechye van ajudar les tropes russes a capturar Kokand.
Turkestan i la regió Transcàspia, on es consolida el poder rus, estan dividits per l'estepa turkmena, la població nòmada de la qual continua atacant. Abans de l’oasi, on s’aixecava la fortalesa dels turkmens, Geok-Tepe, hi havia un desert de 500 versts. El 1877 i el 1879. Les tropes russes van intentar dues vegades sense èxit ocupar aquesta fortalesa. El 1880 el general Skobelev va iniciar una campanya contra Geok-Tepe des de la costa del Caspi. Juntament amb ell hi ha el 1r regiment Labinsky, 1r Poltava i 1r Taman de l'exèrcit cosac de Kuban. Un destacament del general Kuropatkin, que inclou els cosacs d'Orenburg i Ural, es dirigeix cap a Skobelev des del Turquestan. Els destacaments es reuneixen a Geok-Tepe. El setge de la fortalesa comença el 23 de desembre de 1880 i el 12 de gener de 1881 és pres per la tempesta. Per aquesta batalla, el 1r regiment Taman del Kuban va rebre la bandera de Sant Jordi. Així, tota Àsia Central va ser annexionada a Rússia.
